세계적인 육종학자를 위한 첫걸음!

비싼 리갈종과 라산이네 리갈이 교배된 교배종 종자를 운 좋게 몇 립 구해 파종했는데 현재 17개정도 발아를 했다. 앞으로 어떻게 성장을 할지 너무 기대가 되는 품종!  이건 메종드파파님 스토어에서 구입한 유럽 리톱스 믹스 씨앗 구입했을때 서비스로 챙겨주신건데 발아율이 좋다. 다양한 코노 믹스가 섞여있다는데 어떻게 자랄지 기대가 된다.

이전에 분석을 한 콩들이 7s a' subunit이 존재하여 42 single seeds로 분리되는걸 찾아달라고 하셨다.  단백질의 유무에 따라 발아를 시켜야하기 때문에 콩을 다 쓰면 안되고 발아에 지장이 없도록 자엽부분만 약간 잘라내어 단백질을 추출시킨다.  7s a' subunit은 단백질의 양이 조금 많이 필요하기 때문에 자엽도 최대한 많이 잘라 넣었고, Tris 양도 약간 적게 넣었다. 이번에 사용한 Tris 용량은 80마이크로리터를 사용했고, 원심분리가 끝난 단백질은 40-50마이크로 리터를 추출했다. 다음주 월요일에 SDS-PAGE를 실시할 예정이다.9,13번 7S a' subunit free15번, 16번, 18번, 20번, 25번 7S a' subunit free34번, 37번, 39번, ..

단백질 추출  졸업논문 작성을 위해서 교수님이 단백질 분석을 맡기시고 가셨다. 이번 졸업논문 주제는 7S ά subunit이 제거된 콩 선발인 것 같다.  자엽의 색이 녹색인 2가지 계통을 주셔서 Full seed로 단백질 추출을 진행했다. 왼쪽 control 은 대원콩을 사용했다. 대원콩은 노란색 대두콩이기 때문에 노란빛을 띠는 모습을 보인다.  7S ά subunit은 SDS-PAGE로 분석하고, 단백질양이 많이 필요로 하기 때문에 총 1000 ㎕ (1ml) 추출을 하여 원심분리기를 돌렸다.(사진은 안 찍어둬서 다른 걸로...)  원심분리가 끝나면 0.6ml 마이크로 튜브에 400 ㎕ 정도 뽑아서 정량을 실시했다. SDS-PAGE는 정량이 딱히 필요하지는 않지만, 논문 사진용으로 들어가는 거라 혹시 ..

녹차 씨앗 발아시키기에 들어간 지 정확히 30일이 되는 날 얼마나 발아가 되었을지 확인을 해보니 총 11 립이 발아를 했다. 15 립을 파종을 했었던 것 같은데, 아직까지 발아할 가능성이 있으니 지켜봐야겠다.  많은 사람들이 녹차는 뭉텅이로 키우는것 같아서 화분 두 개에 나누어 하나는 5 립, 하나는 6 립을 파종했다.  이미 발아를 한 종자들이지만 나중에 까먹을까봐 파종날짜와 이름을 표기했다. 요즘 날씨가 많이 쌀쌀해져서 베란다에 두면 싹이 괜찮을지 걱정은 조금 되지만 어쩔 수 없다...ㅎ

조직배양 수업 4주 차에 양파 생장점 배양을 실시했었는데, 몇 개가 잘 살아서 2주 전쯤 순화처리를 진행했었다. 다행히 무사히 순화를 마쳐서 오늘 흙으로 옮겨주기로 했다.  배양병에서 꺼내고 잘 씻고,  실험실에 있던 화분에 옮겨주었다. 아직까지 약한 모종이라 직광에 노출되면 죽는다고 해서 실내에서 조금 키우다가 적응하면 차차 밖으로 옮겨 심어야겠다.

요즘 수확을 막 끝난 상태라 교수님께서 실험용 콩들을 많이 주신다. 그걸 다 분석을 해야 하는데 모든 실험의 기초가 되는 작업이 1. 단백질 추출 2. 단백질 정량이다. 특히나 이번에 확인해 볼 P34유전자는 단백질 양이 많이 측정되면 없는 경우에도 있다고 뜰 수가 있어서 단백질 정량을 필수로 해야 한다고 한다.    단백질 추출  이번에 교수님께서 주신 콩은 총 26종류였다. 봉투 하나당 콩 종자 5알씩 들어있었는데, 그걸 일일이 핀셋으로 종피를 벗겨내고 망치로 부순 후 막자사발로 다 갈아줬다.  이번에는 Tris Buffer을 5mL 넣고 원단백질 추출을 완료했다.    단백질 정량  다음날엔 단백질 정량을 실시했다. 앞서 언급했다시피 P34 단백질을 확인할때에는 많은 단백질 함량을 조금 낮추는 게 ..